Nghiên cứu chế tạo que thử sắc ký miễn dịch nano từ tính đểphát hiện nhanh kháng nguyên NS1 của virut Dengue gây bệnh sốt xuất huyết trên địa bàn Hà Nội

Tên nhiệm vụ: Nghiên cứu chế tạo que thử sắc ký miễn dịch nano từ tính đểphát hiện nhanh kháng nguyên NS1 của virut Dengue gây bệnh sốt xuất huyết trên địa bàn Hà Nội

Tổ chức chủ trì nhiệm vụ : Bệnh viện Quân y 103

Họ và tên chủ nhiệm nhiệm vụ và người tham gia chính:

Chủ nhiệm nhiệm vụ: TS. HOÀNG XUÂN CƯỜNG

Đồng chủ nhiệm TS. NGUYỄN THANH XUÂN

Cán bộ phối hợp:

Đào Văn Thắng, Đỗ Như Bình, Hoàng Vũ Hùng, Trịnh Công Điển, Đỗ Thị Lệ Quyên, Nguyễn Văn Trường, Nguyễn Văn Diễn, Hoàng Trung Kiên, Nguyễn Thị Vân, Nguyễn Thị Hoa, Phạm Mạnh Cường, Phạm Hùng Tiến, Nguyễn Văn Bằng, Nguyễn Minh Nam, Nguyễn Việt Phương, Lê Văn Nam, Phạm Văn Minh, Tống Thọ Thắng, La Quang Hổ, Lương Thương Nghiệp, Phạm Thị Liễu, Nguyễn Đức Điển, Vũ Tùng Sơn, Nguyễn Cường Thạch, Nguyễn Ngọc Tuấn, Hoàng Anh Tuấn, Hoàng Đắc Thăng.

Mục tiêu của nhiệm vụ :

- Chế tạo que thử sắc ký miễn dịch nano từ tính sử dụng kháng thể tự tạo để phát hiện nhanh kháng nguyên NS1 của virut Dengue gây bệnh sốt xuất huyết.

- Xác định độ nhạy, độ đặc hiệu, ngưỡng phát hiện, độ ổn định của que thử nghiên cứu.

Kết quả thực hiện (tóm tắt)

1. Chế tạo thành công que thử sắc ký miễn dịch nano từ tính sử dụng kháng thể tự tạo để phát hiện nhanh kháng nguyên NS1 của virut Dengue với cấu trúc 2 phần:

- Cộng hợp kháng thể đơn dòng kháng kháng nguyên NS1 tự sản xuất trên chuột BALB/c gắn hạt nano từ có kích thước 200 nm và bảo quản đông khô trong ống eppendoft 0,5ml (tỷ lệ 50 µg kháng thể/mg hạt tử)

- Que thử theo nguyên lý sắc ký miễn dịch với 2 vạch thử nghiệm (test line) gắn kháng thể kháng kháng nguyên NS1 (kháng thể bắt giữ - HM164) và vạch kiểm chứng (control line) chứa kháng thể kháng IgG từ dê. Liều lượng in kháng thể là 1,5 µl /cm/vạch cho tín hiệu 2 vạch tương đương nhau. Vị trí vạch thử nghiệm và vị trí vạch kiểm chứng lần lượt cách mép dưới que thử là 1,5 cm và 2,0 cm; que thử có kích thước: dài 5 cm x rộng 4 mm

2. Que thử có khả năng xác định kháng nguyên NS1 của 4 týp vi rút Dengue gây bệnh sốt xuất huyết với ngưỡng phát hiện ở mức nhiễm chủ động là 0,05 µl /ml; khi sử dụng phương pháp hiện màu enzyme, giúp xác định được ngưỡng phát hiện 4 týp DENV trong khoảng từ 0,05 - 0,1 ng/ml; độ nhạy 98,34% và độ đặc hiệu 95% khi so sánh với phương pháp realtime RT-PCR ở quy mô phòng thí nghiệm. Độ ổn định của que thử khoảng 3 tháng khi bảo quản ở điều kiện 2-4°C.

Phạm vi và địa chỉ ứng dụng các kết quả của đề tài

- Kết quả nghiên cứu của đề tài có thể được đưa ra áp dung trong các lĩnh vực đào tạo và hỗ trợ chẩn đoán

- Địachỉ ứng dụng dự kiến là Bệnh viện Đa khoa Đống Đa, Bệnh viện Đa khoa Hà Đông

Thời gian bắt đầu và thời gian kết thúc :

Thời gian bắt đầu: 10/2020

Thời gian kết thúc: 9/2022 (Gia hạn đến 3/2024)